LB培养基配方
LB培养基(Luria-Bertani medium)是最为广泛使用的常规微生物培养基,适用于大多数微生物的生长,是微生物实验室中必备的基础实验室试剂。LB培养基是一种复合培养基,由多种有机和无机化合物组成。接下来就让我们来了解一下LB培养基的配方。
主要成分
LB培养基的主要成分包括:
液体培养基中每升含10克蛋白胨及5克酵母提取物,加10克氯化钠使pH调节至7.2-7.4,煮沸后分装消毒。
固体培养基中每升含10克蛋白胨及5克酵母提取物,加10克氯化钠,加入15克琼脂,煮沸后分装消毒。
配制方法
以1L液态LB培养基为例:
称取10克蛋白胨粉、5克酵母提取物粉、10克氯化钠,转移到锅中。加入800ml 纯水,小火煮沸。
搅拌均匀,可加入生长因子、酶解物和色素后溶于培养基中,如需要调节pH,则用0.1M的NaOH加至pH7.2-7.4。
加入蒸馏水补至1000ml。
在121℃下高压灭菌20min。
固态LB培养基与液态LB培养基的制备方法是类似的,在煮沸后加入琼脂,并在121℃下高压灭菌约20min。
应用
LB培养基广泛应用于细菌的分离、纯化、鉴定、培养和储存。同时也可用于真菌和其他微生物的培养。LB培养基是一种富含氮源和碳源的培养基,为微生物的生长、繁殖和代谢提供了充分的营养和条件。LB培养基被广泛应用于生物化学研究、生命科学研究、分子生物学研究及基因工程等领域。
注意事项
在制备LB培养基时,需要注意以下几点:
避免添加过多蛋白胨和酵母提取物,否则会导致胶体沉淀。
不要使用含有碳水化合物和脂肪的培养基组分,否则会干扰菌落形成和观察。
pH值不要超过7.5,否则会影响微生物的生长。
在培养前需要进行高压灭菌,否则会有细菌污染。